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尼古丁檢測(cè)試劑的幾個(gè)相關(guān)操作技巧點(diǎn)擊次數(shù):992 更新時(shí)間:2022-12-13

   尼古丁檢測(cè)試劑采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法和膠體金免疫層析法原理定性檢測(cè)尿液中的尼古丁,以金標(biāo)尼古丁單克隆抗體作為指示標(biāo)記物,在硝酸纖維素膜上的檢測(cè)線處和控制線處分別包被尼古丁-BSA結(jié)合物和羊抗鼠IgG多克隆抗體。檢測(cè)時(shí),尿樣在毛細(xì)效應(yīng)下層析。如尿樣中的尼古丁濃度低于200ng/mL時(shí),金標(biāo)抗體不能全部與尼古丁結(jié)合,未結(jié)合的金標(biāo)抗體在層析過程中與固定在檢測(cè)線處的尼古丁-BSA結(jié)合物結(jié)合,從而在檢測(cè)區(qū)(T)出現(xiàn)一條紫紅色條帶;如尿樣中尼古丁濃度高于200ng/mL時(shí),金標(biāo)抗體全部與尼古丁結(jié)合,從而在檢測(cè)區(qū)(T)因?yàn)楦?jìng)爭(zhēng)反應(yīng)不會(huì)與尼古丁-BSA結(jié)合物結(jié)合而不出現(xiàn)紫紅色條帶。無論尿樣中是否存在尼古丁,控制區(qū)(C)都會(huì)出現(xiàn)一條紫紅色條帶。控制區(qū)(C)所呈現(xiàn)的紫紅色條帶是判斷是否有足夠的尿樣,層析過程是否正常的標(biāo)準(zhǔn),同時(shí)也作為試劑的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。尼古丁檢測(cè)試劑的17個(gè)相關(guān)操作技巧如下:
 
  1.切記在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
 
  2.合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
 
  3.在吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
 
  4.務(wù)必做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。
 
  5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。
 
  6.為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
 
  7.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。
 
  8.ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,加樣后及時(shí)放人孵箱,標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗干凈。
 
  9.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
 
  10.人ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
 
  11.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
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